Untuk meminimalkan stress dan mendapatkan rekaman BP yang stabil, penanganan yang halus dan sesuai insting hewan (handling) sangat esensial:
Lepas Endplate: Buka pelat penutup belakang dari animal restrainer (tabung akrilik).
Posisi Tangan: Pegang hewan pengerat dengan lembut pada bagian pangkal ekor dan letakkan di atas meja sehingga hewan menghadap menjauh dari operator.
Insting Masuk: Ambil tabung restrainer dan arahkan ujung yang terbuka ke arah wajah tikus dari depan. Rats/Mice memiliki kecenderungan alami untuk berjalan memasuki area gelap/sempit seperti tabung (restrainer) tanpa perlu dilatih paksa.
Tutup & Kunci: Setelah hewan masuk, segera tutup kembali pelat ujung (endplate).
Pasang Sensor (Pangkal Ekor): Lewatkan ekor melalui sensor manset (cuff). Posisikan cuff sedekat mungkin ke pangkal ekor, lalu kencangkan ke pelat menggunakan dua (2) sekrup nilon. Pastikan ada jeda 1/6 inci agar tidak mencekik sirkulasi awal.
Catatan (Manual Hal 14): Jangan memasukkan hewan ke dalam restrainer yang dingin. Biasakan (training) hewan dalam tabung setidaknya 1-2 jam/hari selama seminggu sebelum percobaan asli.
Metode Non-Invasive Tail-Cuff
Sistem IITC MRBP mengukur tekanan darah hewan pengerat (tikus/mencit) tanpa pembedahan. Sistem ini menggunakan sensor fotolistrik sensitif yang dipasang pada pangkal ekor, yang mendeteksi perubahan volume darah (pulsa) selama deflasi manset (cuff).
Pentingnya Kontrol Suhu
Suhu ruang normal hewan adalah ~27°C. Pada suhu ini, hewan menahan sirkulasi darah ke ekor (pulsasi lemah/hilang).
Rats (Tikus Besar): Suhu chamber ideal disetel pada 30 - 32°C.
Mice (Mencit): Suhu chamber ideal disetel pada 32 - 34°C.
Peringatan Thermo-Stress: Suhu yang terlalu panas (>34°C untuk rats) akan membuat hewan stres, bernapas berat, meronta, dan mengacaukan pembacaan tekanan darah.
Peringatan Keras Pembersihan (CRITICAL)
Saat membersihkan tabung penahan hewan (Restrainer) yang terbuat dari bahan Plexiglas, HANYA BOLEH MENGGUNAKAN SABUN RINGAN DAN AIR.
JANGAN gunakan Alkohol (atau desinfektan berbasis alkohol).
JANGAN gunakan Amonia.
JANGAN gunakan Pemutih (Bleach).
JANGAN gunakan Pembersih Kaca.
Penggunaan bahan kimia di atas akan menyebabkan Plexiglas retak seperti jaring laba-laba (spider-crack). Kerusakan ini tidak ditanggung garansi (sesuai Manual MRBP).
Pencegahan Edema
JANGAN membiarkan ekor dalam kondisi tertekan (inflasi) terlalu lama. Lakukan maksimal 3-4 siklus tes berturut-turut pada satu hewan, kemudian berikan waktu istirahat minimal 5 menit sebelum tes berikutnya.
Recording Window (Parameter Pembacaan)
Systolic: Ditentukan dari tekanan saat onset (kemunculan pertama) pulsa kembali saat cuff deflasi. Ditandai dengan garis Hijau.
Mean BP: Ditentukan dari tekanan pada amplitudo pulsa maksimum pertama setelah systolic. Ditandai dengan garis Merah.
Diastolic: Dihitung otomatis oleh sistem berdasarkan rumus Pulse Pressure. Diastolic = (3 × Mean - Systolic) / 2
Heart Rate: Mengukur waktu antar pulsa dan menampilkannya dalam Beats Per Minute (BPM). Frekuensi normal denyut ekor tikus adalah 340-380 BPM (membedakan dari artefak napas yang hanya 80-120 BPM).
Konfigurasi Pengguna (User Config)
Sebelum pengujian dimulai, sistem MRBP memungkinkan pengaturan melalui panel Touch Screen untuk mengoptimalkan pembacaan:
Run Start Pressure: Tekanan inflasi awal (dalam mmHg). Sebaiknya disetel ~50 mmHg lebih tinggi dari estimasi tekanan sistolik hewan.
Test Termination Pressure: Batas tekanan akhir (dump pressure) yang mengakhiri perekaman. Disetel ~100 mmHg di bawah Start Pressure.
Chamber Temperature: Setelan pemanas. Normalnya 32°C untuk rats (tikus besar) dan 34°C untuk mice (mencit).
Number of Runs: Jumlah siklus perekaman yang berjalan otomatis. Umumnya disetel antara 3 hingga 5 kali run untuk merata-ratakan hasil.
Delay Between Runs: Waktu jeda (detik) antar siklus untuk mengistirahatkan ekor. Normal disetel 5 detik.
User Config (LCD Panel)
Fisiologi Hewan
Modul: MRBP (Non-Invasive Blood Pressure)
SOP Pengujian MRBP:
Pembersihan Restrainer (Sabun & Air).
Konfigurasi Alat (User Config).
Handling 1: Pegang tikus pada pangkal ekor.
Handling 2: Arahkan tube ke depan kepala tikus.
Handling 3: Pasang Endplate & Sensor.
Masukkan Restrainer ke Chamber & Panaskan.
Aklimatisasi Hewan (Min. 5 Menit).
Mulai Perekaman (Start Live Run).
Sistem IITC MRBP diinisiasi. Buka [Manual] untuk panduan teknik handling yang direkomendasikan.
Mesin
⚙️User Config
Handling
🧤Pegang Ekor
🕳️Arahkan Tube
🔌Tutup & Sensor
Proses
🌡️Masuk Chamber
⏳Aklimatisasi
📊Start Run
PROSEDUR GAGAL
Terdapat kesalahan teknis pada operasional.
RECORDING WINDOW
Pengukuran tekanan darah non-invasive selesai. Berikut adalah parameter hemodinamik yang terekam pada instrumen:
Group:Kelompok-A
Animal:Tikus-01
Run:1 / 3
Heart Rate:0 BPM
Systolic0mmHg
Mean BP0mmHg
Diastolic (Calc)0mmHg
* Diastolic dihitung otomatis menggunakan rumus (3 × Mean - Systolic) / 2